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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠腎足細胞

英文名稱：Mouse primary renal podocytes

組織來源：腎臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介：

腎小球為血液過濾器，腎小球壁構(gòu)成過濾膜。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層結(jié)構(gòu)：內(nèi)層為內(nèi)皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細胞層，上皮細胞又稱足細胞，其不規(guī)則突起稱足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾膜過濾后，濾液入腎小球囊。在正常情況下，血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過而保留于血液中，僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過。

腎足細胞即腎小球上皮細胞，它附著于腎小球基底膜的外側(cè)，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。

足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與腎小球基底膜相連。足細胞在正常情況下可以分泌腎小球基底膜的主要組成成分 IV型膠原和纖維連接蛋白,在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質(zhì)金屬蛋白酶和組織蛋白酶，從而在腎小球基底膜的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。

細胞特性：

1）細胞來源于實驗動物正常腎臟組織。

2)細胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：不規(guī)則，含足突細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF原代 腎足 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

DAPI染色試劑盒100T

人β-防御素1(DEFB1)elisa檢測試劑盒

細胞ITK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

小鼠嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)elisa檢測試劑盒

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa檢測試劑盒

細胞ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒

乳酸含量（LA）測試盒

紅細胞可溶性膜蛋白（粗提）制備試劑盒

小鼠多肽YY(PYY)elisa檢測試劑盒

血小板反應結(jié)構(gòu)域蛋白7A抗體 THSD7A

液泡蛋白分選蛋白45A抗體 VPS45A

低密度脂蛋白受體相關蛋白12抗體（抑制腫瘤蛋白7） LRP12

短鏈脫氫還原酶13抗體 DHRS13

FITC標記人CD326 (Ep-CAM)單克隆抗體 human CD326/FITC

FLJ46536蛋白抗體 RUFY4/FLJ46536

硫辛酰連接酶2抗體 LIPT2

球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體 FCER1G

4號染色體開放閱讀框27抗體 C4orf27

7跨膜蛋白超家族成員1抗體 GPCR TM7SF1

激肽原1重鏈抗體 Kininogen 1

鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白2抗體 HCN2

Ras蛋白特異核苷酸釋放因子4抗體 RASGRP4

RNA相關結(jié)合蛋白MCG10抗體 MCG10

絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 Afadin

突觸結(jié)合蛋白12抗體 Synaptotagmin XII

大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa檢測試劑盒

線粒體二羧酸載體蛋白20抗體  Anti-SLC25A20

堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗大鼠IgG H&L

Rabbit Anti-Rat IgG H&L / AP

小鼠腎足細胞ERGIC1蛋白抗體

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用