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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞

英文名稱：Mouse Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells

組織來源：骨骼肌

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的微血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個內(nèi)皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來血管內(nèi)皮細胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來源的內(nèi)皮細胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細胞，它們又存在器官和組織的特異性。骨骼肌組織是動物體內(nèi)含量多的組織，肌肉組織供血豐富，是研究內(nèi)皮細胞功能和血管生成的理想靶組織。

實驗室分離的小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法、專用培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠白介素3(IL-3)檢測試劑盒 ，英文名： IL-3 ELISA Kit

Mouse soluble ierleukin 2 receptor beta chain (IL-2sR beta) ELISA Kit 小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)檢測試劑盒

ELISA 小鼠干擾素-a(mouse IFN-a)  進口分裝

CLIAKitforINH-B(HumaninhibinB)ELISAKit人抑制素B

通用型柑橘頑固病螺原體(Spiroplasmacii;Sc)試劑盒20次

ELISAKitFree-T3大鼠游離三甲狀腺原

FSTL3重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 Protein

CGA(Chromogranin A 0.5mgCGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原

IL36B重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein

CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白

IL18R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CGA(Chromogranin A 0.5mgCGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原

CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白

FSTL3重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

IL36B重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein

小鼠(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat hexokinase (HK) ELISA Kit 大鼠己糖激酶(HK)檢測試劑盒

Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit 人抗組蛋白抗體(AHA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu檢測試劑盒人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體分離(粗提)試劑盒10次

MouseAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit小鼠心肽(ANP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞小鼠類胰島素生長因子-2   英文名稱：   Insulin like Growth Factor 1 2   規(guī)格：      英文縮寫：   IGF-2

小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-1   規(guī)格：      英文縮寫：   IGFBP-1

小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-2   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-2   規(guī)格：      英文縮寫：   IGFBP-2

小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-3   規(guī)格：      英文縮寫：   IGFBP-3

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用