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產品名稱:小鼠肝竇內皮細胞

產品特點:小鼠肝竇內皮細胞公司正在出售的產品人胃癌細胞;MGC-803 人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1 胎盤絨毛癌細胞,JAR細胞 Sf-21細胞,昆蟲細胞系 小鼠網織細胞肉瘤;M5076 人前列腺癌細胞;LNCaP 大鼠肺大動脈平滑肌細胞培養基 PC-12(高分化)

產品型號:

更新日期:2024-12-16

訪問次數:312

小鼠肝竇內皮細胞的詳細資料:

小鼠肝竇內皮細胞

實驗報告:

小鼠肝竇內皮細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

小鼠肝竇內皮細胞

小鼠肝竇內皮分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞(SEC)是肝臟內所占比例高的非實質細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內皮下基膜形成,產生類似于連續型毛細血管的結構,這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發病前期階段均有出現,近年來受到廣泛關注。

產品名稱

小鼠肝竇內皮細胞

組織來源

肝臟組織

英文名稱

Mouse Hepatic   Sinusoidal Endothelial Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

小鼠肝竇內皮細胞

公司實驗室分離的小鼠肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠肝竇內皮經CD31、CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

小鼠肝竇內皮細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠肝竇內皮細胞

注意事項:

小鼠肝竇內皮細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
小鼠肝竇內皮細胞

總蛋白定量測定試劑盒(帶標準:BCA法)(比色法)

總超氧化物歧化酶(SOD)測定試劑盒(WST-1法)

乳酸(lacticacid)測定試劑盒(測血清、組織等)(比色法)

羥脯酸(Hyp)測定試劑盒(堿水解法)(測動物血清、組織、尿液)

豬孕酮(PROG)試劑盒

Human erythrocyte membrane protein (EMP) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒

RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit 兔子補體片斷3a(C3a)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAPF(Humanai-perinuclearfactor)ELISAKit人抗核周因子抗體

血清鈣比色法定量試劑盒50

PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit豬白介素6(IL-6)試劑盒

IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein

MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質金屬蛋白酶-9(抗原)

WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標簽) Protein

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)

HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)

泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L)

BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)

NXPH1重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 標簽) Protein

IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標簽)

PFN2重組人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠肝竇內皮細胞大鼠果糖胺(FRA)試劑盒 ,英文名: FRA ELISA Kit

Rabbit inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 兔誘導型合成酶(iNOS)試劑盒

新型甲型H1N1流感病毒(IAV-H1N1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-8(HumanMaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase)ELISAkit人基質金屬蛋白酶8/粒細胞膠原酶

體液基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitTM犬血栓調節蛋白


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