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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔外周血單個(gè)核細(xì)胞

英文名稱：Rabbit Peripheral Blood Mononuclear Cells

組織來(lái)源：血液組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔外周血單個(gè)核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町悾虼说靡苑蛛x出不同的細(xì)胞。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單個(gè)核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血單個(gè)核經(jīng)過檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ANXA5 ELISA Kit

Mouse ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 小鼠原激活肽(TAP)檢測(cè)試劑盒

Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGGT(Humangammaglamylanspeptidase)ELISAKit人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶

細(xì)胞甘油-3-0酸脫氫酶-2(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

Kruppel樣因子4(KLF4)重組蛋白 Recombinant Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

RNASE1重組人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

GPT2 Protein Rat 重組大鼠 GPT2 蛋白

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

AIF1重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 Protein

小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit G(IgG)檢測(cè)試劑盒

HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Equinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/ELA檢測(cè)試劑盒馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑20次

Mousecoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔外周血單個(gè)核細(xì)胞小鼠熱休克蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠熱休克蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠熱休克蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠熱休克蛋白試劑盒、小鼠熱休克蛋白檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠熱休克蛋白9檢測(cè)試劑盒   小鼠熱休克蛋白9試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠熱休克蛋白9試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠熱休克蛋白9試劑盒、小鼠熱休克蛋白9檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠缺血修飾白蛋白試劑盒、小鼠缺血修飾白蛋白檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠全段甲狀旁腺素檢測(cè)試劑盒   小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠全段甲狀旁腺素試劑盒、小鼠全段甲狀旁腺素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用