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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱(chēng)：兔輸卵管上皮細(xì)胞

英文名稱(chēng)：Rabbit Fallopian Tube Epithelial Cells

組織來(lái)源：輸卵管

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔輸卵管上皮分離自輸卵管組織；輸卵管位于子宮底兩側(cè)，包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢，是輸送卵細(xì)胞進(jìn)入子宮的管道，也是卵受精的場(chǎng)所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部，管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞，壺腹部的皺襞發(fā)達(dá)，高而多分支，故管腔不規(guī)則；至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞組成。纖毛細(xì)胞以漏斗部和壺腹部多，至峽部和子宮部逐漸減少，纖毛向子宮方向擺動(dòng)，使卵移向子宮并阻止病菌進(jìn)入腹膜腔.分泌細(xì)胞表面有微絨毛，頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒，其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細(xì)胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下，隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進(jìn)輸卵管上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)的功能活動(dòng)，在子宮內(nèi)膜增生晚期（排卵前）。纖毛細(xì)胞變成高柱狀，纖毛增多，分泌細(xì)胞頂部充滿分泌顆粒，功能旺盛。至分泌晚期，兩種細(xì)胞均變矮，分泌細(xì)胞的分泌顆粒排空，纖毛細(xì)胞的纖毛也減少。

實(shí)驗(yàn)室分離的兔輸卵管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔輸卵管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔輸卵管上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒   小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒、小鼠熱休克蛋白糖蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠乳酸脫氫酶試劑盒   小鼠乳酸脫氫酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠乳酸脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠乳酸脫氫酶試劑盒、小鼠乳酸脫氫酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒   小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒、小鼠乳鐵傳遞蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠前心肽試劑盒   小鼠前心肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠前心肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前心肽試劑盒、小鼠前心肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin G, Fc segme receptor (Fc gamma R I /CD64) ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒

HumanAquaporin4,AQP-4ELISAKit 人水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

EquineBeta-Endorphin,β-EP試劑盒馬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母S腺苷同型半胱核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HAVCR1重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mgHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原

FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein

CNPY4 Protein Human 重組人 CNPY4 蛋白

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mgHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原

CNPY4 Protein Human 重組人 CNPY4 蛋白

HAVCR1重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein

兔輸卵管上皮細(xì)胞大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)試劑盒 ，英文名： FGF2 ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒

Ratisletcellaibody,ICAELISAKit 大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFFA(Humanfreefattyacids)ELISAKit人游離脂肪酸

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)

RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit大鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用