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產(chǎn)品名稱:兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細(xì)胞裂解液 EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細(xì)胞裂解液 CM-H102表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基幼蚊細(xì)胞;C6/36 MFC 小鼠胃癌細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2024-12-12

訪問(wèn)次數(shù):342

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

兔腸微血管內(nèi)皮分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段,也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便,再通過(guò)直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細(xì)微的血管,管徑平均為6-9μm,連于動(dòng)、靜脈之間,互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還常可見(jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細(xì)胞。

產(chǎn)品名稱

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來(lái)源

英文名稱

Rabbit Intestinal   Microvascular Endothelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡(jiǎn)介:

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸微血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

兔腸微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

注意事項(xiàng):

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒

Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)檢測(cè)試劑盒

HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2檢測(cè)試劑盒人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

ICOS重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

α2-巨球蛋白(α2M)重組蛋白 Recombinant Alpha-2-Macroglobulin (a2M)

HNRNPR重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

CDH18 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

AKT3重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

CDH1重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytovillin / Ezrin protein (cytovillin/ezrin) ELISA Kit 人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)檢測(cè)試劑盒

HumanSS-A/RoaibodyELISAKit 人抗SS-A/Ro抗體檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4檢測(cè)試劑盒人周期素依賴性激酶4(CDK-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織GRK5激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人過(guò)氧化酶(GSH-Px)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(GSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

17-類固醇(17-KS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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