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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞

英文名稱：Human Endometrial Stem Cells

組織來(lái)源：子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人子宮內(nèi)膜分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能，具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力，運(yùn)用 MSCs來(lái)修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP3β)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： MIP3β ELISA Kit

Monkey tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 3 (AIL-R3) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測(cè)試劑盒

RatgranzymesB,Gzms-BELISAKit 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforfPSA(HumanFreeProstateSpecificAigen)ELISAKit人游離前列腺特異性抗原

細(xì)胞肌酸激酶(CK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒25次

RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit大鼠0脂酶A2(PL-A2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

PTPN6重組小鼠 PTPN6 蛋白 (aa 207-597, His & GST 標(biāo)簽) Protein

甘丙肽(GAL)重組蛋白 Recombinant Galanin (GAL)

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

甘丙肽(GAL)重組蛋白 Recombinant Galanin (GAL)

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

PTPN6重組小鼠 PTPN6 蛋白 (aa 207-597, His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

豚鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： TIMP2 ELISA Kit

Human pulmonary surfacta associated protein C (SP-C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)檢測(cè)試劑盒

rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit 兔子γ干擾素(IFN-γ)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBDNF(MouseBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子

細(xì)菌總RNA分離試劑盒20次

RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit兔半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞羧酸酯酶（CarE）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   25管/24樣

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   25管/24樣

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   25管/24樣

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用