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產品名稱：人外周血T淋巴細胞

英文名稱：Human Peripheral Blood T Lymphocyte Cells

組織來源：外周血

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

人外周血T淋巴分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞（PBMC）即外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離出不同的細胞。T淋巴細胞（T-lymphocyte）來源于骨髓的多能干細胞（胚胎期則來源于卵黃囊和肝）。在人體胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干細胞或前T細胞遷移到內，在激素的誘導下分化成熟，成為具有免疫活性的T細胞。成熟的T細胞經血流分布至外周免疫器官的依賴區定居，并可經淋巴管、外周血和組織液等進行再循環，發揮細胞免疫及免疫調節等功能。T細胞的再循環有利于廣泛接觸進入體內的抗原物質，加強免疫應答，較長期保持免疫記憶。T細胞的細胞膜上有許多不同的標志，主要是表面抗原和表面受體。這些表面標志都是結合在細胞膜上的巨蛋白分子。多能干細胞轉變為淋巴樣前體細胞（Lymphoid precursor）遷移至，在素的誘導下，經歷一系列有序的分化過程，逐漸在發育成熟為識別各種抗原的T細胞庫。T淋巴細胞進入后先經歷兩個階段：①早期T淋巴細胞發育階段，即始祖CIM和CD8雙陰性T淋巴細胞（double negative cell，DN）分化為CD4和CD8雙陽性T細胞（double positive cell，DP）；②DP細胞分別經歷陽性選擇階段和陰性選擇階段獲取MHC限制性識別能力和對自身抗原的耐受性，發育為其表面標志為CD4或CD8的單陽性T細胞（single positive cell，SP），遷往周圍淋巴器官定居。T細胞是相當復雜的不均一體、又不斷在體內更新、在同一時間可以存在不同發育階段或功能的亞群，但分類原則和命名比較混亂，尚未統一。按免疫應答中的功能不同，可將T細胞分成若干亞群，可作用于Th和Ts，有擴大免疫效果的作用；6、原始的或天然T細胞（Virgin or Natural T cells），他們和抗原接觸后分化成效應T細胞和記憶T細胞；7、記憶T細胞（Memory T cell,Tm），有記憶特異性抗原刺激的作用。T細胞在體內存活的時間可數月至數年。其記憶細胞存活的時間則更長。其中，Th細胞又被稱為CD4+細胞，因為其在表面表達CD4（cluster of differentiation 4）。通過與MHCⅡ（主要組織相容性復合體，major histocompatibility complex）遞呈的多肽抗原反應被激活。MHCⅡ在抗原遞呈細胞（antigen presenting cells,APCs）表面表達。一旦激活，可以分泌細胞因子，調節或者協助免疫反應。Tc細胞又名為CD8+細胞，其表面表達CD8。這類細胞可以通過MHCI與抗原直接結合。淋巴細胞主要包括T淋巴細胞（CD3+），B淋巴細胞（CD19+），NK細胞（CD16+CD56+）。

實驗室分離的人外周血T淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法結合磁珠分選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的人外周血T淋巴經CD3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基：基礎培養基，含IL-2、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態：圓形

傳代特性：不建議傳代

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人外周血T淋巴體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)檢測試劑盒 ，英文名： PF/PFP ELISA Kit

Mouse 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測試劑盒

ELISA 小鼠睫狀神經營養因子(mouse CF)  進口分裝

CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白

通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次

ELISAKitMMP11基質金屬蛋白酶11

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標簽) Protein

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標簽) Protein

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標簽)

C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白

PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標簽)

LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat fibronectin (FN) ELISA Kit 大鼠纖連蛋白(FN)檢測試劑盒

HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生長激素(US-GH)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢ檢測試劑盒人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)檢測試劑盒規格：96T/48T

組織CDK6/CYCD1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteiyrosinephosphatase,PTP/PTPaseELISAKit人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)檢測試劑盒規格：96T/48T

人外周血T淋巴細胞土壤無機0（S-PHOS）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤總0/有機0/無機0含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

土壤脲酶（UE)測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

土壤多酚氧化酶（PPO）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣