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產品名稱:大鼠腦微血管內皮細胞

產品特點:大鼠腦微血管內皮細胞公司正在出售的產品CL-0174NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞) 滑膜細胞培養(yǎng)基SM hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞,3T6swiss細胞 Hs 1.Tes(正常人細胞) LTK 小鼠結締組織纖維細胞 MDA-MB-231 人癌細胞

產品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數(shù):302

大鼠腦微血管內皮細胞的詳細資料:

大鼠腦微血管內皮細胞

實驗報告:

大鼠腦微血管內皮細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

大鼠腦微血管內皮細胞

大鼠腦微血管內皮分離自腦組織;腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同,大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子,調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性,內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下:①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產生很高的跨內皮阻抗,延遲細胞旁的通量;②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構,其液相物質胞飲水平較低;③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統(tǒng),從而產生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

產品名稱

大鼠腦微血管內皮細胞

組織來源

腦組織

英文名稱

Rat Brain   Microvascular Endothelial Cells

產品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

大鼠腦微血管內皮細胞

公司實驗室分離的大鼠腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腦微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

大鼠腦微血管內皮細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠腦微血管內皮細胞

注意事項:

大鼠腦微血管內皮細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
大鼠腦微血管內皮細胞

人脂0壁酸試劑盒   人脂0壁酸試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人脂0壁酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂0壁酸試劑盒、人脂0壁酸試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

人脂聯(lián)素試劑盒   人脂聯(lián)素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人脂聯(lián)素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂聯(lián)素試劑盒、人脂聯(lián)素試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒   人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒、人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

人脂肪酸結合蛋白試劑盒   人脂肪酸結合蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人脂肪酸結合蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:人脂肪酸結合蛋白試劑盒、人脂肪酸結合蛋白試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 ,英文名: iFABP ELISA Kit

Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多藥耐藥相關蛋白(MRP)試劑盒

rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶

細菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20

rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝細胞生長因子(HGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein

Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)

MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白

Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白

MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠腦微血管內皮細胞豚鼠白介素1β(IL1B)試劑盒 ,英文名: IL1B ELISA Kit

Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結合酶(E2/UBCE)試劑盒

rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-CG(HumanChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit人絨毛膜β

細菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量試劑盒20

rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T


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