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產品名稱:大鼠表皮角化細胞

產品特點:大鼠表皮角化細胞公司正在出售的產品5637(人膀胱癌細胞) 大鼠源細胞 Butt's 淋巴瘤細胞,NAMALWA細胞 LLC-MK2細胞,綠猴恒河猴腎細胞 小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9 MCF-7-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)人癌細胞 人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7

產品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數:460

大鼠表皮角化細胞的詳細資料:

大鼠表皮角化細胞

實驗報告:

大鼠表皮角化細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

大鼠表皮角化細胞

大鼠表皮角化分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角化細胞(KC)是構成表皮的主要細胞成分,在體內處于不斷增殖過程中,分裂的角化細胞主要位于其基底層,少數位于棘細胞層。隨著向表層的推移,細胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性。

產品名稱

大鼠表皮角化細胞

組織來源

皮膚組織

英文名稱

Rat Epidermal   Keratinized Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

大鼠表皮角化細胞

公司實驗室分離的大鼠表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠表皮角化經PCNA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

大鼠表皮角化細胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

大鼠表皮角化細胞

注意事項:

大鼠表皮角化細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
大鼠表皮角化細胞

大鼠胱抑素S(CST4)檢測試劑盒 ,英文名: CST4 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E(Apo-E)檢測試劑盒

乙型流感病毒(IBV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-5(Humanmaixmetalloproteinase5)ELISAKit人基質金屬蛋白酶5

體液基質金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitVK1K1

CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein

CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)

CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein

鴨白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai bactericidal permeability increasing protein aibody (BPI-Ab) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)檢測試劑盒

HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 人血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforACO-2(Humanaconitase2)ELISAKit人烏頭酸酶2

煙草葉片原生質細胞分離試劑盒5

Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)檢測試劑盒規格:96T/48T

大鼠表皮角化細胞氧化酶(XOD)測試盒(比色法)

植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)

VitaminE)測定試劑盒(比色法)

超微量Na+K+ATP酶測定試劑盒


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