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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human SCF Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人干細(xì)胞因子（SCF）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8716
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源 SCF (Glu26-Ala189) (P21583) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長(zhǎng)度：重組人SCF 由164個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為18.6 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的20 mM Tris, 50 mM NaCl, pH8.0.

基因ID:4254

使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用動(dòng)?動(dòng)

背景

Stem Cell Factor (SCF) that binds to the c-Kit receptor is produced by fibroblasts and endothelial cells. The soluble and transmembrane forms of the protein are formed by alternative splicing of the same RNA transcript and the presence of both soluble and transmembrane SCF is required for normal hematopoietic function. SCF plays an important role in hematopoiesis, spermatogenesis, and melanogenesis. It also promotes mast cell adhesion, migration, proliferation, and survival. Human SCF shares 79% - 87% a.a. sequence identity with canine, feline, mouse, and rat SCF. Furthermore, human SCF is weakly active on mouse cells.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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UBE2F重組人 UBE2F 蛋白 Protein

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)檢測(cè)試劑盒

Humahyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢ檢測(cè)試劑盒人Ⅲ(FⅢ)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶6(HDAC6)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子催乳素(PRL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員6(PM6)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PM6 ELISA Kit

Mouse ai double sanded DNA aibody / natural aibody DNA (dsDNA) ELISA Kit 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)檢測(cè)試劑盒

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM

脘蛋白糖基化分型(glycoform)試劑盒5次

ELISAKitAMA大鼠抗單核細(xì)胞抗體

重組人干細(xì)胞因子（SCF）ICAM1重組小鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

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