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產品名稱:熒光素酶

產品特點:熒光素酶的相關產品:EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mgEAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質細胞谷運載蛋白3抗原
CANT1 Protein Human 重組人 CANT1 蛋白
OLR1重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

產品型號:

更新日期:2024-11-19

訪問次數:566

熒光素酶的詳細資料:

產品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:

產品英文名稱:Luciferase firefly

產品中文名稱:熒光素酶

規格:10mg

貨號:EY-01X8581
用途:僅供科研研究實驗

特點&優勢:

序列:氨基酸序列來源于:Photinuspyralis(北美螢火蟲)正常表達的熒光素酶。

蛋白長度:重組螢火蟲熒光酶素,預測的理論分子:量為62 KDa。

純度:> 98 % ,使用SDS-PAGE檢測

產品形式:液體形式

保存建議:本產品為液體溶液,需要保存在-20℃。為了保持酶活性:,從而保存更長時間,建議分裝,避免反復凍融。

運輸條件:常溫運輸

背景

螢火蟲熒光素酶催化熒光素與ATP的反應并產生黃綠色光。該酶的分子量為62 kDa,在過氧化物酶體中表達。螢火蟲熒光素酶在細胞生物學和分子生物學中非常有用,能用于細胞活性:檢測和ATP定量檢測的試劑盒研發。

熒光素酶

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數后可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產品:

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小鼠氧化型檢測試劑盒   小鼠氧化型試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠氧化型試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠氧化型試劑盒、小鼠氧化型檢測試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

小鼠試劑盒檢測試劑盒   小鼠試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠試劑盒、小鼠試劑盒檢測試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

小鼠檢測試劑盒   小鼠試劑盒 動?動

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒 ,英文名: MCP1 ELISA Kit

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IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein

CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白

SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標簽)

操作步驟:

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物。

(二)構建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1、 將連接產物轉化大腸桿菌DH5α,根據重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞。

(四)誘導表達

1、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。


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