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OPN  DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)服務(wù)承諾：
一、質(zhì)量保證,有問(wèn)題免費(fèi)包換；
二、提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)（為客戶(hù)提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性）；
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

大鼠骨橋素 OPN DRGelisa試劑盒 Rat Osteopontin/OPN ELISA Kit
OPN  DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)【實(shí)驗(yàn)用途】骨橋素Osteopontin，OPN，又名Eta-1，是一種分泌型多功能糖蛋白。其可能功能包括骨代謝、免疫調(diào)節(jié)、傷口愈合、細(xì)胞存活和腫瘤的發(fā)展。OPN主要由骨、腎、上皮組織合成。OPN在體內(nèi)合成時(shí)，前體有314個(gè)氨基酸，成熟蛋白質(zhì)298個(gè)氨基酸，呈酸性。由于糖化程度不同，分子量從33-75KDa。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
試劑盒組成及試劑配制 ：
1.OPN  DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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操作流程：
（1）OPN  DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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巨噬細(xì)胞集落刺激因子MCSF檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

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牙本質(zhì)涎磷蛋白DSPP檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

牙骨質(zhì)蛋白1CEMP1檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

互生蛋白α1SNTα1檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

互生蛋白β1SNTβ1檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

免疫球蛋白GIgG檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

免疫球蛋白GIgG檢測(cè)試劑盒　規(guī)格：　48T/96T

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n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷　1g　n-Octyl-β-D-Glucopyranoside (OGP)　-20℃保存

1,4- 雙丙烯酰　1g　PDA(1,4-Bis(acryloyl)piperazine)　常溫干燥避光保存

G 鈉鹽　1g　Penicillin G Sodium Salt　室溫保存

吩嗪硫酸甲酯　1g　Phenazine Methosulfate（PMS）　室溫保存

苯磺酰氟　1g　Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride（PMSF）　室溫保存

多聚半乳糖醛酸鈉鹽　1g　Polygalacturonic Acid Sodium Salt　室溫保存

1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯　1g　POPOP（1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene）　室溫保存

硫酸鹽　1g　Protamine Sulfate Salt　室溫干燥保存

5- 磷酸吡哆醛，一水　1g　Pyridoxal 5-Phosphate, Monohydrate　-20℃保存

　1g　Pyridoxamine HCl　-20℃避光保存

魚(yú)藤酮　1g　Rotenone　室溫避光保存

芥子酸　1g　Sinapic Acid　室溫干燥保存

鹽酸　1g　Spectinomycindihydrochloride Pentahydrate　4℃保存

四鹽酸精胺　1g　Spermidine 4HCl　室溫保存

亞精胺三鹽酸鹽　1g　Spermidine Trihydrochloride　-20℃保存
OPN  DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)人肺成纖維細(xì)胞，HPF細(xì)胞　原裝/進(jìn)口　5 ml

人肝Kuffer細(xì)胞　　5 ml

人肝癌　*　5 ml

人肝單核細(xì)胞，HLMC細(xì)胞　原裝/進(jìn)口　500 ml

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞，HHSECP細(xì)胞　　500 ml

小鼠胚胎細(xì)胞，NIH/3T3細(xì)胞　*　500 ml

小鼠前胃癌細(xì)胞，MFC細(xì)胞　原裝/進(jìn)口　500 ml

小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，MA-891細(xì)胞　　5 ml